Floresensiya mikroskopiyası bioloji nümunələri vizuallaşdırmaq və öyrənmək qabiliyyətimizi dəyişdirərək hüceyrə və molekulların mürəkkəb dünyasına getməyə imkan verdi. Floresans mikroskopiyasının əsas komponenti nümunə daxilində flüoresan molekulları həyəcanlandırmaq üçün istifadə olunan işıq mənbəyidir. İllər ərzində hər biri özünəməxsus xüsusiyyətləri və üstünlükləri olan müxtəlif işıq mənbələrindən istifadə edilmişdir.
1. Merkuri lampası
Gücü 50 ilə 200 vatt arasında dəyişən yüksək təzyiqli civə lampası kvars şüşəsindən istifadə etməklə tikilib və sferik formadadır. İçində müəyyən miqdarda civə var. O işləyərkən iki elektrod arasında boşalma baş verir, bu da civənin buxarlanmasına səbəb olur və sferada daxili təzyiq sürətlə artır. Bu proses adətən təxminən 5-15 dəqiqə çəkir.
Yüksək təzyiqli civə lampasının emissiyası elektrod boşalması zamanı civə molekullarının parçalanması və azalması nəticəsində işıq fotonlarının emissiyasına səbəb olur.
Güclü ultrabənövşəyi və mavi-bənövşəyi işıq yayır, bu da onu müxtəlif flüoresan materiallar üçün maraqlı edir, buna görə də flüoresan mikroskopiyada geniş istifadə olunur.
2. Ksenon lampalar
Floresans mikroskopiyasında geniş istifadə olunan digər ağ işıq mənbəyi ksenon lampadır. Ksenon lampalar, civə lampaları kimi, ultrabənövşəyidən yaxın infraqırmızıya qədər geniş dalğa uzunluqlarını təmin edir. Bununla belə, onlar həyəcan spektrləri ilə fərqlənirlər.
Civə lampaları öz emissiyalarını yaxın ultrabənövşəyi, mavi və yaşıl bölgələrdə cəmləşdirir ki, bu da parlaq flüoresan siqnalların əmələ gəlməsini təmin edir, lakin güclü fototoksikliyə malikdir. Nəticədə, HBO lampaları adətən sabit nümunələr və ya zəif flüoresan görüntüləmə üçün qorunur. Bunun əksinə olaraq, ksenon lampa mənbələri müxtəlif dalğa uzunluqlarında intensivliyi müqayisə etməyə imkan verən daha hamar bir həyəcan profilinə malikdir. Bu xüsusiyyət kalsium ionunun konsentrasiyasının ölçülməsi kimi tətbiqlər üçün əlverişlidir. Ksenon lampalar da yaxın infraqırmızı diapazonda, xüsusən də 800-1000 nm ətrafında güclü həyəcan nümayiş etdirir.
XBO lampaları HBO lampaları ilə müqayisədə aşağıdakı üstünlüklərə malikdir:
① Daha vahid spektral intensivlik
② İnfraqırmızı və orta infraqırmızı bölgələrdə daha güclü spektral intensivlik
③ Daha çox enerji çıxışı, obyektiv aperturaya çatmağı asanlaşdırır.
3. LED-lər
Son illərdə flüoresan mikroskopiya işıq mənbələri sahəsində yeni bir iddiaçı ortaya çıxdı: LEDlər. LED-lər millisaniyələrdə sürətli yandırma-söndürmə üstünlüyü təklif edir, nümunəyə məruz qalma vaxtlarını azaldır və zərif nümunələrin ömrünü uzadır. Bundan əlavə, LED işığı sürətli və dəqiq çürümə nümayiş etdirir, uzunmüddətli canlı hüceyrə təcrübələri zamanı fototoksikliyi əhəmiyyətli dərəcədə azaldır.
Ağ işıq mənbələri ilə müqayisədə, LED-lər adətən daha dar bir həyəcan spektri daxilində yayırlar. Bununla belə, çox yönlü çoxrəngli flüoresan tətbiqlərinə imkan verən çoxlu LED lentləri mövcuddur, bu da LED-ləri müasir flüoresan mikroskopiya qurğularında getdikcə daha populyar seçimə çevirir.
4. Lazerlərin İşıq Mənbəsi
Lazer işıq mənbələri yüksək monoxromatik və istiqamətlidir, bu da onları STED (Stimulated Emission Depletion) və PALM (Photoactivated Localization Microscopy) kimi super ayırdetmə üsulları da daxil olmaqla yüksək ayırdetmə mikroskopiyası üçün ideal edir. Lazer işığı adətən hədəf flüorofor üçün tələb olunan xüsusi həyəcan dalğa uzunluğuna uyğun olaraq seçilir, flüoresan həyəcanlandırmasında yüksək seçicilik və dəqiqlik təmin edir.
Floresans mikroskopunun işıq mənbəyinin seçimi xüsusi eksperimental tələblərdən və nümunənin xüsusiyyətlərindən asılıdır. Hər hansı bir köməyə ehtiyacınız varsa, bizimlə əlaqə saxlayın
Göndərmə vaxtı: 13 sentyabr 2023-cü il